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Elisa試劑盒使用中常見的抗凝劑有哪些?
點擊次數(shù):929 更新時間:2022-05-18
  Elisa試劑盒的檢測范圍以ng/ml計。而常見的科研試劑盒中的樣本中的目標蛋白,范圍可隨樣本的類型而變化。所以實驗前應通過文獻和預實驗的方法確定樣本是否在所購的范圍內(nèi),是很重要的步驟。
 
  Elisa試劑盒常見的樣本處理方法:
 
  血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時或 4 度過夜,然后1000×g 離心20分鐘,取上清即可。這是一個讓血液自然凝固的過程,溫度越低,凝集越緩慢,可根據(jù)需要添加促凝劑。
 
  血漿:血漿樣本需要抗凝,一般建議用2.0%EDTA,1%肝素,3.8%C6H5Na3O7作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2~8度1000g離心15分鐘,取上清即可檢測。根據(jù)待檢測目標物的性質(zhì)不同選取不同的抗凝劑。
 
  C6H5Na3O7(檸檬酸鈉):Ca2+有凝血作用,能與血液中的鈣離子形成可溶性的螯合物,從而阻止血液凝固。配成 109mmol/L的濃度和血液1:9, 106mmol/L的濃度和血液1:4
 
  缺點:血液中溶解度低,抗凝作用較弱。
 
  優(yōu)點:對凝血因子有很好的保護作用,大部分凝血試驗都可用C6H5Na3O7抗凝。
 
  二胺四乙酸(EDTA)鹽:與血液中的鈣離子結(jié)合形成配位化合物, 從而阻止血液凝固。15g/L EDTA和血液 1:10
 
  優(yōu)點:對紅細胞和白細胞形態(tài)影響小。
 
  缺點:影響血小板的聚集。不適用于凝血實驗和血小板功能相關實驗的檢測。
 
  肝素:通過與抗凝血酶Ⅲ結(jié)合,增強抗凝血酶的作用,滅活絲氨酸蛋白酶,從而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集,阻止血液凝固。肝素鈉 1g/L 與血液 1:10
 
  優(yōu)點:抗凝能力強、不影響血細胞體積、不易溶血、能耐高溫。
 
  缺點:引起白細胞聚集。肝素抗凝血應于短時間內(nèi)使用,否則放置過久血 液又可凝固。

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